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圆二色谱

由于x射线结晶学和核磁共振波谱学的实验限制（蛋白质的结晶或大小限制），许多蛋白质的三级结构仍然未知。近半个世纪以来，圆二色光谱技术在结构生物学中得到了广泛的应用，主要用于研究蛋白质在溶液中的二级结构、折叠和相互作用。事实上，一个明显的趋势不仅是使用圆二光谱（CD）的研究数量的增长，而且是在多少研究中将圆二光谱（CD）与其他方法结合起来作为结构生物学综合项目的一部分。

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远紫外（波长＜260nm）圆二色光谱（CD）是一种重要而成功的光谱技术，它能提供蛋白质二级结构的有意义的信息。在圆二光谱（CD）中，寻找二级结构的主要方法是通过各种不同的算法将光谱解卷积成所谓的特征光谱的加权和。对于给定的蛋白质，通过每个特征谱的相对重量，可以从组成参考集的蛋白质的结构的已知数据中计算出各自结构元素的丰度。尽管圆二光谱（CD）不能提供原子级的分辨率（与这两种技术不同），但它可以提供关于天然和非天然蛋白质二级结构的有价值的信息，因为它可以应用于广泛的溶液条件（如 pH、盐、有机溶剂、脂类和温度）。即使我们已经有了原子分辨结构，或者在核磁共振测量中验证正确的构象/正确的折叠或溶液条件之前，圆二光谱（CD）也可能是有用的。

IEF 和 cIEF 是 pI 测定中最常用的两种技术，它们可以根据 pI 的不同对蛋白质和多肽进行分离。在 IEF 中，将采用商业化的固定 pH 梯度（IPG）条带或 pH 梯度的一维垂直 IEF 凝胶，与 IPG 条带相比，后者可以以更简单、更节省时间的方式分析多个样品。对于 cIEF，它缩短了分析时间，减少了样品的消耗。在装入毛细管之前，样品将首先与精确的等电点标记剂、两性电解质和稳定剂混合。在毛细管中聚焦完成后，可原位检测蛋白样品的 pI。Aimsmass 有两种方法可用于 pI 测定，我们的科学家将根据您的特殊要求和样品类型优化方案。