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抗体药物修饰分析

经过30多年的快速发展,抗体的生产已成为当今世界的主流生物制药行业最赚钱的领域。抗体的糖型对维持抗体结构和治疗效果至关重要。

附着在蛋白质上的多糖可分为三种类型:N-联、O-联和糖胺聚糖。几乎所有单克隆抗体都有 Asn-XXX-Ser/Thr (XXX≠Pro)序列,这是 CH2 结构域重链 Asn297 残基的 N-糖基化序列。一些单克隆抗体在丝氨酸和苏氨酸残基上具有 O 型连接聚糖,主要发生在铰链区。N-糖基化可以影响 Fc 构象,从而影响抗体与受体的结合亲和力。

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Fc(片段可结晶)效应功能包括抗体依赖的细胞毒性(ADCC)、补体依赖的细胞毒性(CDC)和抗体依赖的细胞吞噬作用。这些功能是由抗原-抗体复合物的形成触发的,这些复合物随后被 Fcγ 受体(Fcγ rs)识别。多糖作为生物的基本组成部分之一,在细胞的分子识别、粘附和信号传递中起着重要的作用。

适当的糖基化对药代动力学至关重要。Fc 效应功能与抗体安全性;因此,检测聚糖对控制抗体质量至关重要。因此,探索评价多糖性质的分析方法在实验室和工业中具有重要的意义。

由于糖结构的复杂性,抗体药物实际上是不同糖型蛋白质的混合物。为了生产均相产物,已经开发了实现特定 N-糖基化类型的方法。

考虑到 N-糖基化对血清中抗体半衰期及其生物活性的重大影响,迫切需要开发可靠的 N-糖基化分析方法。有几种方法可以用来识别附着在抗体 Fc 区上的 N-聚糖。抗体的糖聚糖修饰可以通过三个不同的阶段确定:在完整的糖蛋白水平,在糖肽阶段,或通过分析释放的糖聚糖。

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服务优势

  • 多碎裂:使用多种碎裂方式,同时断裂 b/y 离子和 c/z 离子,糖链信息更丰富。
  • 鉴定快:能够快速定位糖基化修饰位点。
  • 能定量:能否提供具体寡糖类型以及定量结果信息。

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