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磷酸化位点鉴定

磷酸化位点鉴定此项目初步蛋白磷酸化位点定性分析,适合SDS-PAGE或者溶液样本。

蛋白磷酸化是最为广泛,研究最为深入的蛋白翻译后修饰之一,在细胞生理学中扮演着至关重要的作用。磷酸化过程在生物体中是可逆的,并且通过蛋白激酶和蛋白磷酸酶在真核和核生物中起着磷酸化调控的作用。据估计细胞中1/3的蛋白同时发生磷酸化,所有的生命过程都通过此修饰直接或者间接的进行调控。

真核磷酸化位点主要发生在丝氨酸(Ser),苏氨酸(Thr)和酪氨酸(Tyr),而原核磷酸化主要发生在组氨酸(His),精氨酸(Arg)和赖氨酸(Lys)。

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磷酸化修饰通过分子开关的机制,影响并参与了几乎整个细胞生命活动过程,包括蛋白酶活性调节,蛋白转换,蛋白相互作用,亚细胞定位,蛋白构象改变,蛋白稳定性以及连接其他蛋白分子的能力。

磷酸化是研究较为普遍和深入的翻译后修饰,且参与上述多种细胞生命活动,但是关于蛋白磷酸化相关的分子机制,还有许多值得探索和研究的地方。 现在可以通过质谱技术(LC-MS/MS)提供稳定可靠的方法,鉴定已知磷酸化位点和发现新修饰位点。

Aimsmass提供专业的磷酸化位点鉴定服务,蛋白磷酸化是翻译后修饰最常见的一种修饰,在细胞内信号转导中起着重要作用。

实验流程

  • 凝胶或溶液内酶解(depends on type of samples you send us)
  • 磷酸化肽段富集 (optional; depends on the abundance of phosphor-peptide)/li>
  • HPLC 分离, 随后进行MS/MS 分析
  • 磷酸化位点数据分析

服务优势

  • 应用范围广:可对各种蛋白进行磷酸化位点定性和相对定量分析,可找出具体修饰发生位点,结果可信可靠,可给出具体修饰肽段。
  • 操作简单方便:无需进行放射性同位素标记或者Edman降解法进行氨基酸测序。
  • 位点高覆盖(可选):质谱检测前处理可对磷酸化肽段进行富集处理,增加检测覆盖率。

服务流程

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