本产品是一种基于生物素酰基替换法原理开发的专业检测试剂盒，专门用于全蛋白S-亚硝基化修饰的高效检测。通过替换传统CM沉淀的方式，直接结合免疫印迹法（Western Blot）技术，实现对全蛋白样本中亚硝基修饰位点的快速、准确检测。产品中含有配套使用的各种缓冲液，无需再进行其他复杂特定试剂的配置。
| 参数 | 规格 |
|---|---|
| 检测原理 | 生物素酰基替换法（替换传统CM沉淀） |
| 主要应用 | 全蛋白S-亚硝基化修饰检测（组织或细胞样本） |
| 检测方法 | 免疫印迹法（Western Blot） |
| 结果读取 | 链霉亲和素-HRP（Streptavidin-HRP）化学发光检测 |
| 样本类型 | 细胞或组织全蛋白提取物 |
| 主要检测流程 | 封闭 → 还原 → 标记 → 检测 |
| 保存条件 | 参见组分表；不同组分需按说明储存 |
| 试剂名称 | 试剂编号 | 体积（正式） | 储存温度 |
|---|---|---|---|
| Lysis Buffer | Solution I | 8ml | 4℃ |
| Reducing Reagent | Solution II | 1200μl | 4℃/-20℃ |
| Blocking Reagent | Solution III | 120μl | 4℃/-20℃ |
| PC beads | Solution IV | 55μl+55μl | 4℃ |
| +Vc Buffer | Solution V | 6500μl | 4℃ |
| -Vc Buffer | Solution VI | 6500μl | 4℃ |
| BMCC Buffer | Solution VII | 1000μl | 4℃/-20℃ |
| Elution Buffer | Solution VIII | 4000μl | 4℃ |
| Strepdavidin-HRP | Solution IX | 40μl | 4℃/-20℃ |
| 试剂名称 | 试剂编号 | 体积（正式） | 储存温度 |
|---|---|---|---|
| Lysis Buffer | Solution I | 1600μl | 4℃ |
| Reducing Reagent | Solution II | 240μl | 4℃/-20℃ |
| Blocking Reagent | Solution III | 40μl | 4℃/-20℃ |
| PC beads | Solution IV | 15μl+15μl | 4℃ |
| +Vc Buffer | Solution V | 1200μl | 4℃ |
| -Vc Buffer | Solution VI | 1200μl | 4℃ |
| BMCC Buffer | Solution VII | 200μl | 4℃/-20℃ |
| Elution Buffer | Solution VIII | 800μl | 4℃ |
| Strepdavidin-HRP | Solution IX | 40μl | 4℃/-20℃ |
本试剂盒基于生物素酰基替换法原理，通过四个核心步骤检测全蛋白S-亚硝基化修饰：1）封闭游离巯基；2）特异性还原S-亚硝基化修饰，暴露新巯基；3）生物素标记暴露的巯基；4）链霉亲和素-HRP Western Blot检测。该方法替换了传统CM沉淀方式，操作更简便快捷。
主要优势包括：1）无需复杂的CM沉淀步骤，实验流程简化；2）检测过程快捷方便；3）实验操作易上手，不易出错；4）结果可重复性高；5）可直接结合Streptavidin-HRP检测目的蛋白修饰位点。
不同组分保存条件不同：Lysis Buffer、+Vc Buffer、-Vc Buffer、Elution Buffer、PC beads需4℃保存；Reducing Reagent、Blocking Reagent、BMCC Buffer、Strepdavidin-HRP需4℃或-20℃保存。建议严格按照说明书要求储存，工作液建议现配现用。
本试剂盒适用于多数研究组织或细胞中全蛋白亚硝基修饰位点检测。通过对全蛋白提取之后质检合格之后，进行试剂盒处理完成再用免疫印迹的方法进行全部蛋白亚硝基位点验证。
