本产品是一种基于点击化学(Click Chemistry)原理,结合Western Blot(WB)技术快速检测特定蛋白棕榈酰化修饰的检测试剂盒。蛋白棕榈酰化(准确地说是蛋白质S-酰基化)是指脂肪酰部分,通常是16-碳棕榈酰部分,对选定的蛋白质半胱氨酸的硫酯化反应。本试剂盒针对多数研究组织或细胞中特定蛋白S-棕榈酰修饰位点检测所开发,通过点击化学原理对棕榈酰修饰进行探针标记后,按照试剂盒处理流程完成后用免疫印迹的方法进行蛋白棕榈酰位点验证。产品中含有配套使用的各种缓冲液,无需再进行其他复杂特定试剂的配置。
| 参数 | 规格 |
|---|---|
| 检测原理 | 点击化学(Click Chemistry)结合ALK-16探针标记 |
| 主要应用 | 特定蛋白的S-棕榈酰化修饰检测(Western Blot验证) |
| 检测方法 | 免疫印迹法(Western Blot) |
| 探针类型 | ALK-16(含炔基棕榈酸类似物) |
| 检测系统 | 链霉亲和素-HRP(Streptavidin-HRP)化学发光检测 |
| 样本类型 | 细胞裂解液、组织匀浆等蛋白样品 |
| 保存条件 | 参见组分表;主要组分-20℃保存 |
| 运输条件 | 冰袋运输,确保试剂活性 |
| 试剂名称(20rnxs) | 试剂编号 | 体积(正式) | 储存温度 |
|---|---|---|---|
| Palm Probe | Solution I | 350μL | -20℃ |
| 4SB Buffer | Solution II | 40mL | -20℃ |
| Blocking Reagent 1 | Solution III | 1100μL | -20℃ |
| Blocking Reagent 2 | Solution IV | 550μL | -20℃ |
| CUAAC Buffer | Solution V | 1100μL | -20℃ |
| 2SB Buffer | Solution VI | 45mL | -20℃ |
| Capture Beads | Solution VII | 2600μL | 4℃ |
| Washing Buffer | Solution VIII | 55mL | -20℃ |
| Reducing Buffer | Solution IX | 5100μL | -20℃ |
| Blocking Reagent 3 | Solution X | 550μL | -20℃ |
| 试剂名称(4rnxs) | 试剂编号 | 体积(正式) | 储存温度 |
|---|---|---|---|
| Palm Probe | Solution I | 60μL | -20℃ |
| 4SB Buffer | Solution II | 7mL | -20℃ |
| Blocking Reagent 1 | Solution III | 200μL | -20℃ |
| Blocking Reagent 2 | Solution IV | 100μL | -20℃ |
| CUAAC Buffer | Solution V | 200μL | -20℃ |
| 2SB Buffer | Solution VI | 8mL | -20℃ |
| Capture Beads | Solution VII | 500μL | 4℃ |
| Washing Buffer | Solution VIII | 10mL | -20℃ |
| Reducing Buffer | Solution IX | 1000μL | -20℃ |
| Blocking Reagent 3 | Solution X | 100μL | -20℃ |
AM10818试剂盒基于点击化学(Click Chemistry)原理,通过ALK-16棕榈酰化类似物探针标记棕榈酰化蛋白,再通过生物素-链霉亲和素系统进行Western Blot检测。该技术特异性强,灵敏度高,可准确检测特定蛋白的S-棕榈酰化修饰。
ALK-16是一种含有炔基的棕榈酸类似物,可作为棕榈酰化蛋白的代谢标记探针。它能够被细胞内的棕榈酰转移酶识别并整合到棕榈酰化蛋白中,然后通过点击化学反应与含有叠氮基的生物素分子进行特异性偶联,实现后续检测。
完整实验流程通常需要2-3天:第一天进行细胞培养和探针标记(4-6小时);第二天进行点击化学反应和样品制备(3-4小时);第三天进行Western Blot检测和结果分析(6-8小时)。具体时间可能因实验条件而异。