蛋白质异戊烯化是一种关键且普遍的翻译后修饰,通过在蛋白质羧基末端附近的半胱氨酸残基上添加法尼基或香叶基类异戊二烯基团实现。此修饰对众多蛋白质的正确亚细胞定位、膜结合及功能活性至关重要,并与多种人类疾病(如癌症、神经退行性疾病)的发生发展密切相关,已成为重要的治疗靶点。本产品 全蛋白异戊烯免疫印迹检测试剂盒(法尼基)AM10921 基于先进的点击化学(Click Chemistry)原理开发,结合成熟的免疫印迹(Western Blot)技术,实现对活细胞中全蛋白水平异戊烯化修饰(特别是法尼基化)的一站式、快速检测。试剂盒提供全套优化缓冲液,用户无需自行配置复杂试剂,极大简化了实验流程。
| 参数 | 规格 |
|---|---|
| 检测原理 | 基于点击化学(CuAAC)的生物素标记与免疫印迹法 |
| 主要应用 | 全蛋白水平的S-异戊烯化修饰(法尼基化)检测 |
| 检测方法 | 免疫印迹法(Western Blot) |
| 探针标记 | 活细胞代谢标记(需用户自备含炔基的Farnesol类似物探针*) |
| 结果读取 | 链霉亲和素-HRP(Streptavidin-HRP)化学发光检测 |
| 样本类型 | 贴壁或悬浮培养的哺乳动物细胞 |
| 保存条件 | 详见组分表;不同组分分置4℃或-20℃保存 |
| 运输条件 | 冰袋运输 |
| 试剂名称 | 组分编号 | 体积 (20rxns) | 体积 (4rxns) | 储存条件 |
|---|---|---|---|---|
| Probe reaction buffer (探针反应缓冲液) | Solution I | 260 μL | 60 μL | 4℃ |
| Lysis Buffer (细胞裂解液) | Solution II | 10 mL | 2 mL | 4℃ |
| CUAAC click labeling Buffer (点击化学标记缓冲液) | Solution III | 450 μL | 80 μL | 4℃ |
| Blocking Reagent (封闭试剂) | Solution IV | 340 μL | 80 μL | 4℃ |
| Streptavidin-HRP (链霉亲和素-HRP) | Solution V | 40 μL | 40 μL | -20℃ |
| GGTIase Inhibitor Buffer (GGTIase抑制剂缓冲液) | Solution VI | 140 μL | 30 μL | -20℃ |
| 产品说明书 | 1份 |
本试剂盒(AM10921)主要针对蛋白质的**法尼基化(Farnesylation)**修饰进行检测。异戊烯化主要包括法尼基化和香叶基化,本试剂盒使用的探针和体系对法尼基化修饰具有特异性捕获和检测能力。
标准流程分为四步:1)活细胞探针标记(数小时);2)细胞裂解;3)点击化学介导的生物素标记(约2小时);4)Streptavidin-HRP Western Blot检测(约1天)。从细胞处理到获得WB结果,通常需要2-3个工作日。
是的。试剂盒提供了从探针标记反应缓冲液(Solution I)、细胞裂解液(Solution II)、点击化学标记缓冲液(Solution III)、封闭试剂(Solution IV)到检测核心试剂链霉亲和素-HRP(Solution V)的全套溶液。GGTIase抑制剂(Solution VI)用于增强信号特异性。用户只需自备细胞、培养基及WB常规试剂即可。